Nilalaman

• Pangunahing Pagkakaiba
• Southern Blotting kumpara sa Bahid ng mga kanluranin
• Tsart ng paghahambing
• Ano ang Southern Blotting?
• Ano ang Western Blotting?
• Pangunahing Pagkakaiba
• Konklusyon

Pangunahing Pagkakaiba

Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng Southern Blotting at Western Blotting ay ang Southern Blotting ay isang pamamaraan na ginagamit upang makita ang isang tiyak na fragment ng DNA sa isang ibinigay na sample samantalang ang Western Blotting ay ginagamit upang malaman ang isang tiyak na protina sa isang naibigay na sample.

Southern Blotting kumpara sa Bahid ng mga kanluranin

Ang blotting ay isang pamamaraan na ginagamit ng mga siyentipiko upang paghiwalayin ang iba't ibang uri ng mga molekula mula sa isang halo o sample. Sa pamamaraang ito, ang mga macromolecules tulad ng mga nucleic acid (DNA at RNA) at mga protina sa isang halo ay lumilipat sa pamamagitan ng isang slab ng gel. Dito, ang mga minuto na partikulo ay lilipat nang mas mabilis kaysa sa mga mas malaki. Ang mga molekula na ito ay pinindot laban sa ibabaw ng isang hindi nabago na lamad na naglilipat ng mga molekula sa lamad. Mayroong iba't ibang mga uri ng blotting batay sa pagtuklas ng mga tukoy na materyal, i.e., southern blotting, hilagang blotting, at western blotting. Ang Southern blotting ay ang uri ng blotting na ginagamit upang makita ang DNA habang ang western blotting ay ginagamit upang malaman ang protina. Ang pagbagsak ng Southern ay binuo ni Edward M. Southern noong 1975. Kaya, kilala ito bilang Southern blotting. Sa kabilang banda, ang pag-blot sa kanluran ay binuo ng pangkat ni George Stark sa Stanford University noong 1979. Ang pangalang ito ay ginamit upang tumugma sa southern blotting. Ginagamit ang Southern blotting upang malaman ang isang tukoy na pagkakasunod-sunod ng DNA samantalang, ang western blotting ay ginagamit upang malaman ang isang tiyak na amino acid o pagkakasunud-sunod ng protina.

Tsart ng paghahambing

Southern Blotting	Bahid ng mga kanluranin
Ang isang pamamaraan na ginagamit upang malaman ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng DNA sa isang ibinigay na halo ay kilala bilang timog na blotting.	Ang isang pamamaraan na ginagamit upang malaman ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng mga amino acid ng protina sa isang ibinigay na halo ay kilala bilang timog na blotting.
Binuo Ni
Ang pagbasag sa Southern ay binuo ni Edward M. Southern noong 1975.	Ang pamumula sa kanluran ay binuo ng pangkat ni George Stark sa Stanford University noong 1979.
Uri ng Detection
Ginagamit ang Southern blotting upang malaman ang isang tukoy na pagkakasunud-sunod ng DNA.	Ginagamit ang Western blotting upang malaman ang isang tukoy na pagkakasunud-sunod ng amino acid o protina.
Prinsipyo
Gumagana ito sa prinsipyo ng hybridization.	Gumagana ito sa prinsipyo ng pamamaraan ng immunodetection o pakikipag-ugnay ng antigen-antibody.
Probe
Ang isang solong-stranded DNA o kung minsan RNA ay ginagamit bilang isang pagsisiyasat.	Ang mga pangunahin at pangalawang antibodies ay ginagamit bilang isang pagsisiyasat.
Gel electrophoresis
Ang Agarose gel electrophoresis ay ginagamit sa Southern blotting.	Ang SDS PAGE / Polyacrylamide gel na ginamit upang paghiwalayin ang mga protina sa western blotting
Pamamaraan sa Pag-blot
Ang Southern blotting ay sumusunod sa pamamaraan ng paglipat ng capillary.	Ang Western Blotting ay sumusunod sa pamamaraan ng paglipat ng kuryente.
Halimbawang
Sa panahon ng Southern blotting, ang sample ay kailangang ma-denaturate.	Sa panahon ng pag-blotting ng kanluran, ang sample ay dapat na nasa katutubong estado.
Paghaharang
Walang anumang hakbang tulad ng pag-block ay kasangkot sa southern blotting.	Sa panahon ng pag-blot ng kanluran, ang mga nonspecific antibody site ay naharang sa papel na nitrocellulose sa tulong ng milk powder o bovine serum albumin (BSA).
Mga Paraan ng Pagmamarka
Ang mga karaniwang pamamaraan ng pag-label na ginagamit sa timog na blotting ay ang paggamit ng mga chromogenic dyes o radiolabelling o fluorescent labelling atbp.	Ang mga pamamaraan ng pag-label na ginamit sa western blotting ay ang paggamit ng fluorescently na may label na antibody o radiolabelling, chromogenic dyes o pagbuo ng diaminobenzidine, atbp.
Mga Paraan ng Pagkita
Ang pagtuklas ng ilaw, Autoradiograph, at mga pagbabago sa kulay ay ginagamit bilang mga pamamaraan ng pagtuklas sa timog na blotting.	Ang mga pamamaraan ng pagtuklas sa blotting ng kanluran ay mga pagbabago sa kulay at pagtuklas ng ilaw atbp.
Application
Ginagamit ang Southern blotting sa pagtuklas ng DNA, pagsusuri sa paternity, pag-finger ng DNA, para sa pagkakakilanlan ng biktima, para sa pagkilala sa mga kriminal, upang makahanap ng mga nakakahawang ahente at upang makilala ang pagbago o pagbuo ng gene, atbp	Ginagamit ang Western blotting upang mahanap ang bilang ng protina sa isang halo, upang makita ang pagkakaroon ng HIV, virus, at bakterya, atbp sa suwero, upang malaman ang mga may sira na protina at ginamit bilang isang tiyak na panukala para sa herpes, hepatitis B, Lyme sakit, at sakit na Creutzfeldt-Jacob, atbp.

Ano ang Southern Blotting?

Ang Southern blotting ay ang pinakalumang paraan ng blotting na ibinigay ni Edwin Southern kaya, pinangalanan bilang southern blotting. Ginagamit ito upang malaman ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng DNA sa isang naibigay na sample o halo. Ang mga hakbang na kasangkot sa timog na blotting ay electrophoresis, paglipat, at pagtuklas ng mga tiyak na pagkakasunud-sunod. Una sa lahat, ang DNA ay fragmentized sa tulong ng mga tiyak na paghihigpit na enzyme. Pagkatapos ay nais na mga fragment ng DNA ay pinaghiwalay sa pamamagitan ng gel electrophoresis. Ang mga fragment na ito ay ipinakita sa tulong ng isang alkalina na solusyon, hal., NaOH, atbp upang paghiwalayin ang dalawang mga strand ng DNA. Ang mga solong-stranded na mga fragment ng DNA pagkatapos ay inilipat sa isang lamad sa pamamagitan ng proseso ng pag-blotting. Ang DNA na may nakagapos na lamad ay pagkatapos ay tratuhin ng isang may label na probe. Ang pagsisiyasat na ito ay ilalagay sa komplimentaryong strand nito sa membrane DNA na maaaring ma-visualize ng autoradiogram atbp.

Ano ang Western Blotting?

Ang pamamaraan ng pamumula sa kanluran ay naimbento ng pangkat ni George Stark sa Stanford University na ginagamit upang makilala ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng mga amino acid sa protina. Kilala rin ito bilang protocol blot o immune-blotting. Ang mga hakbang sa panahon ng western blotting ay electrophoresis, paglipat, at pagtuklas ng mga tiyak na protina. Una sa lahat, homogenize ang pinaghalong. Pagkatapos ay paghiwalayin ang molekula ng interes sa tulong ng mga electrophoresis. Ilipat ang mga molekulang ito sa lamad at kilalanin ang tukoy na protina sa pamamagitan ng paggamit ng tukoy na pagsisiyasat.

Pangunahing Pagkakaiba

1. Ang isang pamamaraan na ginagamit upang malaman ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng DNA sa isang naibigay na halo ay kilala bilang timog na blotting samantalang, isang pamamaraan na ginagamit upang malaman ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng mga amino acid na pagkakasunud-sunod ng protina sa isang ibinigay na halo ay kilala bilang timog na blotting.
2. Ang pagbagsak ng Southern ay binuo ni Edward M. Southern noong 1975 sa gayon, na kilala bilang southern blotting. Sa kabilang banda, ang pamumula sa kanluran ay binuo ng pangkat ni George Stark sa Stanford University noong 1979.
3. Ginagamit ang Southern blotting upang malaman ang isang tukoy na pagkakasunud-sunod ng DNA. Sa kabaligtaran, ginagamit ang western blotting upang malaman ang isang tukoy na pagkakasunud-sunod ng amino acid o protina.
4. Gumagawa ang Southern blotting sa prinsipyo ng hybridization sa flip side; gumagana ang western blotting sa prinsipyo ng pamamaraan ng immunodetection o pakikipag-ugnay ng antigen-antibody.
5. Ang isang solong-stranded DNA o kung minsan ang RNA ay ginagamit bilang isang pagsisiyasat sa Southern blotting sa kabilang panig, sa western blotting pangunahing at pangalawang antibodies ay ginagamit bilang isang pagsisiyasat.
6. Ang Agarose gel electrophoresis ay ginagamit sa southern blotting habang ang SDS PAGE / Polyacrylamide gel na ginagamit upang paghiwalayin ang mga protina sa western blotting.
7. Ang Southern blotting ay sumusunod sa pamamaraan ng paglipat ng capillary, sa kabilang banda; sinusundan ang western Blotting na pamamaraan sa paglipat ng kuryente.
8. Sa panahon ng Southern blotting, ang sample ay kailangang ma-denaturate, samantalang, sa panahon ng western blotting, ang sample ay dapat na nasa katutubong estado.
9. Walang anumang hakbang tulad ng pag-block ay kasangkot sa southern blotting sa flip side, sa panahon ng western blotting, ang mga nonspecific antibody sites ay naharang sa papel na nitrocellulose sa tulong ng gatas na pulbos o bovine serum albumin (BSA).
10. Ang mga karaniwang pamamaraan ng pag-label na ginagamit sa timog na blotting ay ang paggamit ng mga chromogenic dyes o radiolabelling o fluorescent label atbp samantalang, ang mga pamamaraan ng pag-label na ginamit sa western blotting ay ang paggamit ng fluorescently na may label na antibody o radiolabelling, chromogenic dyes o pagbuo ng diaminobenzidine, atbp.
11. Ang pagtuklas ng ilaw, Autoradiograph, at Pagbabago ng kulay ay ginagamit bilang mga pamamaraan ng pagtuklas sa timog na blotting, samantalang, ang mga pamamaraan ng pagtuklas sa blotting ng kanluran ay mga pagbabago sa kulay at pagtuklas ng ilaw, atbp.
12. Ang timog na blotting ay ginagamit sa pagtuklas ng DNA, pagsusuri sa paternity, pag-finger ng DNA, para sa pagkakakilanlan ng biktima, para sa pagkilala sa mga kriminal, upang makahanap ng mga nakakahawang ahente at upang makilala ang pagbago o pag-aayos ng gene, atbp. pinaghalong, upang makita ang pagkakaroon ng HIV, virus, at bakterya, atbp sa serum, upang malaman ang mga may sira na protina at ginamit bilang isang tiyak na panukala para sa herpes, hepatitis B, sakit sa Lyme, at sakit na Creutzfeldt-Jacob, atbp.

Konklusyon

Sa itaas talakayan ay nagbubuod na ang timog na blotting ay ang pinakalumang pamamaraan ng blotting na ginamit upang malaman ang mga tiyak na segment ng DNA sa isang sample habang ang western blotting ay natuklasan na huli at ginamit upang makilala ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ng mga amino acid o isang tiyak na protina.